關鍵詞:原位雜交檢測技術服務|實驗技術服務
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原位雜交檢測技術服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數據真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒，客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
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測序實驗流程：
（1）樣品的固定；
（2）樣品的制備和預處理；
（3）預雜交；
（4）探針和樣品變性；
（5）用不同的探針雜交以檢測不同的靶序列；
（6）漂洗去除未結合的探針；
（7）檢測雜交信號，進行結果分析
(1)石蠟切片(5 um)，常規脫蠟水化： 二甲苯10min×3次、質量濃度為100%乙醇5 min×2次、95%乙醇5 min、70%乙醇5min、50%乙醇5 min、自來水洗5 min。
(2)正常山羊血清封閉，37℃ ，30min；
(3)加入I抗(兔抗鼠白蛋白)，37℃ ，1 h；
(4)Ⅱ抗(FITC標記，羊抗兔IgG，)，37℃ ，30min；
(5)8%硫氰酸鈉，80℃ ，10 min；
Devil以新鮮配制的胃蛋白酶(4 mg／m1)將切片于37℃消化1～1.5 h；以甘氨酸溶液終止消化
(7)4%多聚甲醛固定2 min；梯度酒精脫水，空氣干燥；
Musical Note將15ul Y染色體探針(cy3標記)加于組織上，蓋上蓋片，置于雜交盒內，60℃變性10 min；37℃ ，避光雜交；
(9)50％甲酰胺／2×SSC，37℃洗滌5 min；2×SSC，37℃洗滌5 min；
(10)0.1% 吐溫20／4×SSC，37℃洗滌10 min，干燥后鏡檢。
雜交所用的探針大致可以分類三類：
1）染色體特異重復序列探針，例如α衛星、衛星III類的探針，其雜交靶位常大于1Mb，不含散在重復序列，與靶位結合緊密，雜交信號強，易于檢測；
2）全染色體或染色體區域特異性探針，其由一條染色體或染色體上某一區段上極端不同的核苷酸片段所組成，可由克隆到噬菌體和質粒中的染色體特異大片段獲得；
3）特異性位置探針，由一個或幾個克隆序列組成。
可采用不同類型的封片液。如果封片液中不含有Mowiol（可使封片液產生自封閉作用），為防止蓋片與載片之間的溶液揮發，可使用指甲油將蓋片周圍封閉。封好的玻片標本可以在-20～-70℃的冰箱中的暗盒中保持數月之久。